Kontrolle des Abschlusses des biologischen Säureabbaus

Rolf Maurer und Lilli Mayer
Staatliche Lehr- und Versuchsanstalt für Wein- und Obstbau Weinsberg

Der vermehrte Einsatz des biologischen Säureabbaues in jüngster Zeit läßt befürchten, daß nicht immer das notwendige Verständnis für die komplexen Zusammenhänge im Wein vorliegt. Der vorliegende Artikel klärt auf und zeigt praktische Möglichkeiten, um den BSA zu kontrollieren und richtig zu überwachen.

Einleitung

Situation:

Der biologische Säureabbau wird immer mehr durchgeführt
Während langer Jahre weigerte sich die deutsche Weinwirtschaft hartnäckig den biologischen Säureabbau (BSA) als vollwertiges Verfahren bei der Weinbereitung anzuerkennen. Er wurde immer mit dem Makel belegt die behandelten Weine zu schädigen. Nur wenige Kellermeister besaßen den Mut und die praktische Geschicklichkeit diesen vortrefflichen biologischen Prozeß zur Verbesserung ihrer Weine zu nutzen. Dies war so, obwohl in früheren Jahren in manchen Gebieten, z.B. in Württemberg, der BSA grundsätzlich bei allen Weinen angestrebt wurde

Erst mit dem verstärkten Aufkommen des Rotweinanbaues, unter dem Eindruck der internationalen Praxis der Weinbereitung und auf Drängen der Industrie hat man sich in den letzten Jahrgängen wieder dem biologischen Abbau zugewandt. Dazu haben erheblich die jetzt auf dem Markt angebotenen verbesserten Säureabbaukulturen beigetragen. Sie sind in der Tat ein nützliches Hilfsmittel um den normalerweise spontan aber etwas langsam verlaufenden biologischen Prozeß zu beschleunigen und sicherer zu machen.

Oft nicht richtig mit dem Verfahren vertraut
Einige Kellerwirte, die jetzt mit dem BSA arbeiten sind jedoch mit dem Verfahren noch nicht oder nicht mehr richtig vertraut. So stellt man fest, daß häufig Unsicherheiten hinsichtlich der Vorausberechnung der zu erwartenden Endsäuren, der richtigen Rahmenbedingungen, der konsequenten Durchführung des Vorganges und der Bewertung seines Ablaufs und Endes herrschen.

Unsicherheiten über das Ende der Äpfelsäuregärung
Eine besondere Schwierigkeit scheint darin zu liegen, den Abschluß des biologischen Säureabbaus richtig zu erkennen und auch önologisch zu werten. Eine Fehleinschätzung dieses Punktes kann jedoch zu fatalen Folgen für den späteren Wein führen. Außer unnötigen Qualitätsverlusten können nachträgliche Säureverluste auftreten, die weit über das gewünschte Maß hinausgehen oder es können sogar Weinkrankheiten aus diesem Grunde aufkommen.

Ein Kernproblem ist hierbei, daß sich die genaue Beobachtung des Säureabbaues und dadurch auch die exakte Abschätzung seines Endes, der einfachen Beobachtung entzieht. Zwar kann man einen titrimetrisch meßbaren Säureverlust und einen leichten pH-Anstieg im Wein leicht ermitteln, aber eine spezifische Aussage über den Verlauf und das Ende des BSA ist damit noch lange nicht gemacht.

Bedeutung der richtigen Erkennung des Abschlusses des BSA

Vielfältige Einflüsse auf die Säurebilanz durch die Gärung
Die Säurewerte der Moste sind leicht zu erfassen und im Falle von gesundem Lesegut auch einfach zu interpretieren. Mengenmäßig spielen hier nur Wein- und Äpfelsäure eine Rolle. Durch die Gärung ändern sich jedoch diese klaren Verhältnisse. Die im Most aktiven Mikroorganismen bilden eine ganze Reihe von neuen Säuren in unterschiedlichen Mengen. Gleichzeitig wird, bedingt durch die veränderten Lösungsverhältnisse, in erheblichem Umfang Weinsäure ausgefällt. Nachfolgende Untersuchungen des Gesamtsäurewertes lassen daher selbst bei getrennter Bestimmung der Weinsäure keine Aussage über den Gehalt an einzelnen Säuren mehr zu. Der tatsächliche Ablauf und Erfolg des biologischen Säureabbaues kann deshalb nur an der Höhe des jeweiligen Restgehaltes an Äpfelsäure objektiv beurteilt werden.

Der Äpfelsäureabbau soll vollständig ablaufen
Im Gegensatz zu chemischen Entsäuerungsprozessen, bei denen es üblich ist, eine willkürliche Säuremenge zu entfernen, empfiehlt sich bei der biologischen Entsäuerung normalerweise der vollständige Abbau der vorhandenen Äpfelsäure. Erforderlichenfalls kann später zusätzlich eine Korrekturentsäuerung mit kohlensaurem Kalk oder zugelassenen Kaliumsalzen nachfolgen.

Hierfür sprechen eine Reihe von Gründen: Wie Zucker für die Hefen ist Äpfelsäure für viele im Wein auftretende Bakterien ein Nährstoff,. Weine, die noch Reste dieser Säure enthalten, sind deshalb genauso gefährdet in einen nicht gewollten nachträglichen biologischen Säureabbau zu geraten, wie restsüße Weine Gefahr laufen eine unerwünschte Nachgärung durchzumachen. Der beim Jungwein stattfindende BSA kann kontrolliert und gelenkt werden. Ein ungewollt eintretender nachträglicher Abbau verläuft zufällig, und unbeeinflußt und häufig unerkannt. Findet er gar erst auf der Flasche statt, so wird der betroffene Wein in der Regel sehr stark geschädigt.

Man hat von Trauben mehr als 400 Bakterienarten isoliert, die in der Lage sind Milchsäure zu bilden und Äpfelsäure, mindestens teilweise, abzubauen. Die meisten von ihnen besitzen einen wenig reintönigen Stoffwechsel, einige sind sogar ausgesprochene Auslöser von Krankheiten; zufällige Infektionen sind deshalb immer gefährlich für den Wein.

Die Erfahrung lehrt, daß Weine, die den biologischen Abbau begonnen haben, eine starke Neigung aufweisen diesen auch zu Ende zu führen. Erst wenn die Äpfelsäure-Werte unter ca. 1,5 g/l abgefallen sind, kommt im allgemeinen kein BSA mehr auf. Dabei erweist es sich unter praktischen Bedingungen als erstaunlich schwierig diese Erzeugnisse bakterienfrei zu filtrieren. Selbst der Einsatz von Membranfiltern bis herunter zu Porengrößen von 0,45 µm hat wiederholt zu Fehlschlägen geführt. Sicherlich spielen auch vielfältige Möglichkeiten der Reinfektion eine gewisse Rolle. Die bakterienfreie Filtration ist aber an sich schon problematisch.

Die Entwicklung der Bakterien verläuft bei steigenden pH-Werten besser, und eine Reihe von Milchsäurebildnern kann sich erst über pH 3,3 richtig entfalten. Dabei beobachtet man, daß sich die Artenvielfalt und Anzahl der auftretenden Bakterien mit steigendem pH-Wert schnell vergrößert. Ein ähnlich begünstigender Einfluß wird durch abnehmende SO ₂ -Gehalte ausgeübt. Beide Faktoren treffen bei Rotweinen zusammen. Ihre pH-Zahlen sind durch die verstärkte Maischeauslaugung erhöht, ferner weisen sie weniger freies und gesamtes SO ₂ auf, das zudem wegen dem erhöhten pH-Wert auch noch viel schwächer gegen die Bakterien wirkt. Deshalb sind sie für unerwünschte nachträgliche Bakterienentwicklungen geradezu prädestiniert - sofern der Wein noch abbaubare Restäpfelsäure enthält.

Fehlbeurteilung kann zu krassen Ausbaufehlern führen
Aus dem oben gesagten ist leicht abzuleiten, daß es für den Praktiker sehr wichtig ist, den Ablauf und besonders das Ende des biologischen Säureabbaues richtig zu erkennen. Zwei Beispiele sollen dies verdeutlichen:

Fall 1 : Ein Weißwein wird abgestochen mit einem Restgehalt an Äpfelsäure von 3 g/l. . Sein Gesamtsäuregehalt betrage zu diesem Zeitpunkt 8 g/l, der Weinsäuregehalt 3 g/l.. Es wird nun eine Korrekturentsäuerung mit kohlensaurem Kalk um 1,5 g/l vorgenommen um die gewünschte Endsäure von 6,5 g/l zu erreichen. Sein Säurebild könnte dann etwa folgendermaßen aussehen:

Kommt es nun zu einem unerwünschten biologischen Säureabbau, der nicht unterbrochen wird, so vermindert sich die Äpfelsäure auf ca. 0,3 g/l, dafür werden 1,1 g/l Milchsäure neu gebildet. Der Endsäurestand des Weines beträgt also nicht 6,5 sondern nur 4,9 g/l, ein Wert, der für einen Weißwein deutlich zu niedrig ist.

Fall 2 : In einem Rotwein wird der biologische Säureabbau bei einem Äpfelsäure-Gehalt von 3 g/l unterbrochen. Es erfolgt keine Säurekorrektur, weil der vorhandene Gesamtsäurewert von 5,8 g/l als akzeptabel erachtet wird. Während des weiteren Ausbaues erfolgt kein Säureabbau. Bei der Abfüllung gelingt es jedoch nicht, die Bakterien vollständig zu entfernen. Durch längere Lagerung des Weines wächst langsam eine Bakterienpopulation heran, die bei den vorliegenden Bedingungen (z.B. pH 3,4 und 60 mg/l gesamtes SO ₂ ) noch lebensfähig ist. Die Äpfelsäure wird dabei (analog zu Fall 1) umgewandelt, wobei daraus wieder 1,4 g Säure übrig bleiben. Die Gesamtsäure fällt also auf (5,8 - 1,6) 4,2 g/l, während der pH-Wert um ca. 0,1 bis 0,2 Einheiten ansteigen dürfte. Erzeugt der aktive Bakterienstamm Kohlendioxyd, so verbleibt das gebildete Gas im Wein. Pro g abgebauter Äpfelsäure fallen etwa 0,3 g CO ₂ an. Enthält der abgefüllte Wein Restzucker, so kann mit ziemlicher Sicherheit erwartet werden, daß die Bakterien nach der Äpfelsäure den Zucker angreifen und daß daraus eine Weinkrankheit entsteht. Häufig werden solche Weine zäh, bekommen einen Milchsäurestich oder bilden Mannit.

Möglichkeiten zur Erkennung des Endes des BSA

Vorgänge, die den biologischen Säureabbau begleiten
Beim BSA treten im Wein einige typische Einflüsse auf, die in Kombination mit einander relativ sichere Indizien für einen laufenden BSA sind. Leider kann keiner von ihnen Mengenangaben über die bereits abgebaute, oder die noch vorhandene Äpfelsäure geben. Sie sind für den erfahrenen Kellermeister jedoch wertvolle Hilfen zur Kontrolle seiner Weine.

Säureverlust / pH-Wert - Anstieg
Der durch den BSA verursachte Säureverlust kann über die wiederholte Bestimmung der titrierbaren Gesamtsäure relativ leicht analytisch verfolgt werden. Eine genaue Wertung des Äpfelsäuregehaltes ist damit jedoch unmöglich. Man muß sich an der Erfahrung orientieren und durch Vergleich mehrerer ähnlicher Weine abschätzen, ob der Abbau beendet ist.

Der pH-Wert kann als wertvolle Hilfsgröße fungieren. Steigt er über 3,4 oder weist der Jungwein schon von Anfang an solche Werte auf, sollte der Kellermeister seinen Wein besonders kritisch beobachten.

CO ₂ - Entbindung
Der Abbau der Äpfelsäure wird von einer starken CO ₂ -Entwicklung begleitet. Diese kann als Indikator für seinen Ablauf in der Regel dienen. Allerdings sind CO _2- Entbindungen bei Jungweinen auch aus anderen Gründen möglich. Sie müssen also mit Unterscheidungsvermögen und im Vergleich mit anderen Parametern bewertet werden. Umgekehrt ist das Aufhören der Kohlensäureausgasung nicht unbedingt gleichbedeutend mit einem vollständigen Säureabbau.

Sensorik
Erfahrene Kellermeister können einen laufenden BSA am typischen Geschmack erkennen, jedoch ist es sensorisch nicht möglich Restgehalte an Äpfelsäure mengenmäßig zu "erschmecken". Bei Rotweinen kann mit einiger Erfahrung ein abgelaufener, oder, präziser gesagt, ein nicht abgelaufener BSA am Farbausdruck abgelesen werden. Vorhandene Äpfelsäure läßt die Farbe leuchtender, "giftiger" erscheinen. Auch hier sind jedoch vielfältige Einflüsse auf den Farbausdruck vorhanden, welche die Eigenfarbe des Weines überlagern. Quantitative Aussagen über den Äpfelsäuregehalt sind auf diesem Weg ebenfalls unmöglich.

Mikroskopische Kontrolle
Durch eine mikroskopische Untersuchung des für den Abbau vorgesehenen Weines kann man wertvolle Informationen über den Verlauf eines BSA gewinnen. Allerdings sind dazu die entsprechende Ausrüstung und Erfahrung notwendig.

Doppelsalztest ("Strecker - Test")
Der Test wurde 1954 an der Staatlichen Lehr- und Versuchsanstalt für Wein- und Obstbau Weinsberg von Gerhard Strecker entwickelt. Er wird seit dieser Zeit angewendet und zur Kontrolle des Ablaufes des BSA empfohlen. Da das Verfahren bis jetzt nie publiziert wurde, soll es hiermit einem breiten Publikum auch außerhalb unserer direkten Einflußsphäre vorgestellt werden.

Prinzip
In einem engen Glasgefäß wird bei Calciumüberschuß eine Doppelsalzentsäuerung im Minimaßstab durchgeführt. Eventuell ausfallendes Doppelsalz, das sich in der Glasröhre als grober Niederschlag absetzt zeigt das Vorhandensein von Äpfelsäure an. Der Test gestattet die Verfolgung des Ablaufs des Äpfelsäureabbaues und die relativ präzise Bestimmung von dessen Ende. Quantitative Aussagen (g/l Äpfelsäure) sind damit nicht machbar.

Einfache und billige Verfahrensweise
Der Doppelsalztest ist hinsichtlich Einfachheit und Kostengünstigkeit unschlagbar. Die Materialkosten sind zu vernachlässigen und der effektive Zeiteinsatz beschränkt sich auf wenige Minuten.

Man führt den Test in einem Reagenzglas, oder einem anderen, vorzugsweise engen röhrenförmigen Glasgefäß folgendermaßen durch:

Auswertung
In dem Reagenzglas kann man verschiedene Fraktionen von Sedimenten beobachten:

Die Höhe des groben Niederschlags dient zum Abschätzen des Gehaltes an vorhandener Äpfelsäure. Bei Anwesenheit von ca. 6 g/l Äpfelsäure entsteht ein Doppelsalz-Niederschlag von 2-3 cm Höhe, der mit fortschreitendem biologischem Säureabbau abnimmt und am Schluß völlig verschwindet.

Bild 2: So sieht der Doppelsalz - Test aus. 1: Wein ohne BSA, 2: Wein mitten in dem BSA, 3: Wein fertig mit BSA

Ist keine Äpfelsäure mehr vorhanden, sollte man Weißweine unverzüglich abstechen, klären und schwefeln. Bei Rotweinen ist ebenfalls ein baldiger Abstich mit Klärung zu empfehlen.

Ungenau bei sehr kleinen Äpfelsäuremengen
Da das Untersuchungsergebnis auf der Abschätzung des gebildeten Volumens an Ca - Doppelsalz der Wein- und Äpfelsäure beruht, müssen natürlich im Testglas die chemisch - physikalischen Bedingungen für dessen Bildung gegeben sein. Um ablaufen zu können verlangt die Doppelsalzbildung eine gewisse Übersättigung mit Calciummalat. Aus diesem Grund kann der Test ganz geringe Mengen an Äpfelsäure unter etwa 1 g/l nicht mehr sicher anzeigen.

Bei negativem Ergebnis des Strecker - Testes können deshalb 2 Situationen vorliegen:

In beiden Fällen kontrolliert man am untersuchten Gebinde folgende drei Punkte:

Hat der Säuregehalt deutlich abgenommen und die Gasbildung aufgehört oder stark nachgelassen, und ist eine Bereitschaft zum Absetzen des Trubes (evtl. In einer gefüllten Literflasche) zu beobachten, so ist der biologische Säureabbau beendet. Ist der Wein in der Literflasche noch unruhig, befindet er sich dagegen wahrscheinlich in der Endphase des BSA. Will man exakten Einblick in das Ende des Abbaues gewinnen, gelingt dies nur mit Hilfe analytischer Techniken wie sie nachfolgend kurz beschrieben sind.

Analytische Methoden

Meist teure Verfahren
Äpfelsäure läßt sich aufgrund ihrer chemischen Eigenschaften nicht mit einfachen Methoden bestimmen, wie dies zum Beispiel bei der Weinsäure möglich ist. Die wesentlichsten heute üblichen Verfahren, die im folgenden kurz beschrieben werden, sind genau, zeitgemäß aber doch in gewissem Umfang aufwendig. Für praktische Belange kommt hiervon nur die dünnschichtchromatografische Trennung in Frage. Die anderen beiden Methoden erfordern spezielle Geräte und Spezialkenntnisse, die im Kellereilabor wohl kaum vorhanden sein werden.

Dünnschichtchromatografisch
Die Dünnschichtchromatografie (DC) ist eine leicht durchführbare Analysentechnik, bei der das Säuregemisch des Weines auf physikalischem Weg getrennt wird. In der einfachen Form, in der sie bei der Weinuntersuchung verwendet wird, liefert sie nur einen qualitativen Einblick in die Säurezusammensetzung des Weines. Man sieht also nur welche Säuren da sind und kann deren Gehalt lediglich abschätzen. Sie erlaubt aber das Ende des BSA am völligen Verschwinden der Äpfelsäure genau zu erkennen. Deshalb soll Sie nachfolgend genauer erklärt werden.

Prinzip der Methode
Die zu prüfende Probe wird auf eine mit Cellulose beschichtete Glas- oder Kunststoffplatte (20 x 20 cm) aufgetragen. Man trocknet die Platte und stellt sie in eine mit Fließmittel beschickte Entwicklungskammer. Das Fließmittel steigt durch Kapillarwirkung in der Celluloseschicht hoch und trennt dabei die organischen Säuren auf. Danach wird die Platte über Nacht getrocknet. Die getrennten Säuren werden mit Sprühreagenz sichtbar gemacht. Statt der beschichteten Platten kann auch saugfähiges Spezialpapier verwendet werden, man spricht dann von "Papierchromatografie". Anleitungen hierfür finden sich in der einschlägigen Literatur, z.B. TANNER/BRUNNER (1987): Getränke Analytik, Heller Schwäbisch Hall, ISBN 3-98 00 498-1-7

Benötigte Materialien und Reagenzien

Materialien:

Fließmittel:
Gemisch aus n-Butanol/Ameisensäure/Wasser (4/2/5 Teile)

Die abgemessenen Flüssigkeitsanteile werden intensiv im Scheidetrichter durchgeschüttelt und über Nacht stehen gelassen, es kommt zur Trennung in 2 Phasen. Als Fließmittel wird die obere Phase verwendet, die untere (Wasser) wird verworfen. Das Fließmittel ist im Kühlschrank unbegrenzt haltbar, dabei kommt es immer wieder zur Wasserabscheidung. Beim Entnehmen darf deshalb nur die obere Schicht und nicht die untere (Wasser) herausgeholt werden.

Sprühmittel:

Als Sprühmittel dient eine stets frisch bereitete Mischung von 9 Teilen der Lösung A + 1 Teil der Lösung B

Standardlösungen zum Vergleich:

Durchführung der DC-Untersuchung

1. Vorbereitung
Die beschichtete Platte wird der Packung vorsichtig entnommen ohne die Schicht zu verletzen. Um Verwechslungen auszuschließen, beschriftet man die aufgetragenen Proben oberhalb der Laufstrecken mit weichem Bleistift.

2. Auftragen der Probe
Zwei bis drei cm vom unteren Rand der Platte trägt man auf einer Linie die Proben im Abstand von ca. 0,5 cm auf. Zu den seitlichen Rändern sollte der Abstand ca. 3 cm betragen. Die 5-m l-Kapillare wird durch hochsteigenlassen mit Wein gefüllt und dann vorsichtig senkrecht so auf die Celluloseschicht aufgesetzt, daß die Probe von der Schicht aufgesaugt werden kann. Dabei darf die Schicht nicht verletzt werden. Man kann dieselbe Kapillare für mehrere Proben verwenden, sofern sie sehr sorgfältig mit der jeweiligen Probe vorgespült wird, (mehrmals füllen und in das Kleenex-Papier leerlaufen lassen). Damit die Flecken möglichst klein bleiben (Ø ca. 0,5 cm), werden sie sofort mit dem Fön getrocknet. So können auf einer Platte bis zu 10 Proben aufgetragen werden. Man kann am Anfang die vorne genannten Standardlösungen mit auftragen um die Flecken leichter zuordnen zu können.

3. Entwicklung
Nachdem alle Proben aufgetragen sind, wird die Platte noch ca. 5 Minuten an der Luft getrocknet und dann in die mit ca. 25 ml Fließmittel beschickte Entwicklungskammer gestellt. Die aufgetragenen Flecken sollen nicht in die Entwicklungsflüssigkeit eintauchen. Das Fließmittel steigt in der Celluloseschicht langsam nach oben und trennt die im Fleck vorhandenen organischen Säuren gemäß ihrer unterschiedlichen Löslichkeit. Weinsäure bewegt sich kaum, Milchsäure wandert dagegen sehr schnell Äpfelsäure liegt dazwischen. Man entwickelt bis das Fließmittel ca. 15 cm hochgelaufen ist (ca. ½ Stunde). Danach wird die Platte bei Raumtemperatur an der Luft über Nacht getrocknet.

4. Sichtbarmachung und Identifizierung der getrennten Säuren
Die einzelnen Säuren, die nun als unsichtbare getrennte Flecken auf der Platte vorhanden sind müssen zur Identifizierung mit Hilfe eines Sprühmittels sichtbar gemacht werden. Man füllt 10 -15 ml des Reagenzes in den Sprüher ein und besprüht die Celluloseschicht aus ca. 15 cm Entfernung über Kreuz mit Hilfe eines Gummiballes oder von Druckluft. Die einzelnen getrennten Säuren erscheinen als gelbe Flecken auf blauem Untergrund.

Dünnschichtchromatografischer Nachweis organischer Säuren mittels "Wein-Set"
"Wein-Set" ist ein dünnschichtchromatografischer Schnelltest zur Bestimmung der Umwandlung von Äpfelsäure in Milchsäure im Wein.Der Ablauf dieser Bestimmung ist im Prinzip derselbe wie oben beschrieben. Es werden aber kleine (20 x 80 mm) mit Cellulose beschichtete Folien verwendet. Hierdurch erreicht man eine kurze Entwicklungszeit von ca. 15 Minuten. Man verfährt gemäß der Arbeitsanleitung. Im Gegensatz zu der oben geschilderten Methode muß der Wein mit Ionenaustauscher (Harz) behandelt werden. Auf einer solchen POLYGRAM-Folie finden nur 4 Proben und eine Vergleichslösung Platz. Da das "Sprühreagenz" bereits in der Entwicklerlösung enthalten ist erscheinen die Säureflecken direkt beim Entwickeln. Dem Set ist eine Vergleichsschablone beigelegt, die man zur Zuordnung der Flecken verwenden kann, die Kosten betragen ca. DM 150,--.

Enzymatische Bestimmung der L-Äpfelsäure
Die enzymatische Bestimmung der L-Äpfelsäure ermöglicht ganz gezielt nur die Äpfelsäure in Most oder Wein zu bestimmen. Andere anwesende Säuren werden nicht erfaßt. Leider sind die Reagenzien relativ teuer und zur Durchführung ist ein Spektralphotometer erforderlich, außerdem erfordern enzymatische Analysen viel Sorgfalt und fachkundige Arbeitsweise.

Prinzip:
Die Bestimmung der L-Äpfelsäure wird mit Hilfe eines von der Industrie entwickelten UV-Test-Sets durchgeführt.

Benötigte Materialien und Geräte

Bei der Bestimmung verfährt man nach der Arbeitsanleitung des Herstellers. Zur Kontrolle ist im Set eine Standardlösung bekannter Konzentration enthalten. Um sicher zu gehen, daß die Methode im eigenen Labor richtig funktioniert, bestimmt man vergleichsweise in jeder Serie den Gehalt an L-Äpfelsäure in dieser Lösung.

Bestimmung der Äpfelsäure mittels HPLC
Die HPLC (Hochdruckleistungs-Flüssigkeits-Chromatografie) ist ein modernes Analysenverfahren, das auch für die Säureanalyse in Getränken immer mehr Bedeutung gewinnt. Als Vorteil erweist sich die Möglichkeit der gleichzeitigen Erfassung verschiedener Inhaltsstoffe des Weines (typischerweise vieler Säuren zusammen mit Glucose, Fructose, Methanol und Glycerin) mit nur einem kurzen Lauf von ca. 25 Minuten Dauer. Nachteil dieser Methode ist die nötige teure Ausrüstung.

Die HPLC-Anlage besteht aus einer Hochdruckpumpe, Trennsäulen, Ultraviolett- bzw. Refraktionsdetektor, Trennsäulen, Integrator oder Computer mit einem Programm zur Auswertung. .Die Trennsäule ist mit feinstkörnigem aktivem Material gefüllt. Ähnlich wie bei der Dünnschichtchromatografie trennt man die Weininhaltstoffe dadurch, daß man sie gemäß ihrer individuellen Beweglichkeit unter diesen Bedingungen mit Flüssigkeit herausspült und in der "Spülflüssigkeit" nachweist. Die Anlage wird im voraus mit den zu untersuchenden Substanzen geeicht und bei der Bestimmung übernimmt ein Rechner die Identifizierung und mengenmäßige Bestimmung der gesuchten Inhaltsstoffe durch ständigen Vergleich mit dem Eichprogramm

Zusammenfassung
Es ist wichtig, daß der biologische Säureabbau in einem Wein möglichst vollständig erfolgt, weil eventuell verbleibende Äpfelsäurereste nachträglich durch ungewollte Mikroorganismentätigkeit abgebaut werden können. Solche Weine erleiden einen Säuresturz oder werden krank.

Der biologische Säureabbau entzieht sich exakter Beobachtung, weil der wesentliche Faktor der, Rückgang der Äpfelsäure, analytisch nur mit relativ viel Aufwand zu fassen ist. Es wird ein sehr einfach durchzuführender Test beschrieben, der es ermöglicht den Äpfelsäureabbau zu verfolgen und dessen Ende mit hohe Sicherheit abzuschätzen. Weitere analytische Möglichkeiten zur qualitativen und quantitativen Äpfelsäurebestimmung werden kurz erläutert.